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可能你還不知道液相色譜柱的分類(lèi)有這么多吧
點(diǎn)擊次數(shù):4863 更新時(shí)間:2020-08-24
  你知道液相色譜柱的分類(lèi)有哪些么?下面就讓我們一起來(lái)了解一下吧。
 
  (按色譜固定相基質(zhì)分) 一.硅膠基質(zhì):
 
  1.反相色譜柱: 反相色譜填料常是以硅膠為基礎(chǔ),表面鍵合有極性相對(duì)較弱的官能團(tuán)的鍵合相。 反相色譜所使用的流動(dòng)相極性較強(qiáng),通常為水,緩沖液與甲醇,已腈等混合物。
 
  樣品流出色譜柱的順序是極性較強(qiáng)組合先被沖出,而極性弱的組份會(huì)在色譜柱上有更強(qiáng)的保留。 常用的反相填料有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(Phenyl)等。
 
  2.正相色譜: 正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica),以及其他具有極性官能團(tuán),如胺基團(tuán)(NH2,APS)和氰基團(tuán)(CN,CPS)的鍵合相填料。
 
  由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他團(tuán)的極性較強(qiáng),因此,分離的次序是依據(jù)樣品中的各組份的極性大小,即極性強(qiáng)弱的組份先被沖洗出色譜柱。
 
  正相色譜使用的流動(dòng)相極性相對(duì)比固定相低,如:正乙烷(Hexane),(Chloroform),二氯甲烷(Methylene Chloride)等。
 
  3.離子交換色譜柱:以磺化交聯(lián)強(qiáng)陰/陽(yáng)離子鍵合硅膠色譜柱,常用規(guī)格:強(qiáng)陰離子色譜柱(SAX),強(qiáng)陽(yáng)離子交換色譜柱(SCX)
 
  二 .聚合物基質(zhì):
 
  聚合物調(diào)料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等,其主要優(yōu)點(diǎn)是在PH值為1~14均可使用。相對(duì)與硅膠基質(zhì)的C18填料,這類(lèi)填料具有更強(qiáng)的疏水性;
 
  大孔的聚合物填料對(duì)蛋白質(zhì)等樣品的分離非常有效。現(xiàn)在的聚合物填料的缺點(diǎn)是相對(duì)硅膠基質(zhì)填料,色譜柱柱效較低。
 
  三.其他無(wú)機(jī)填料:
 
  其 它HPLC的無(wú)機(jī)填料色譜柱也已經(jīng)商品化。由于其特殊的性質(zhì),一般僅限于特殊的用途。如石墨化碳也用于正逐漸成為反相色譜填料。
 
  這種填料的分離不同與硅膠 基質(zhì)烷基鍵合相,石墨化碳的表面即是保留的基礎(chǔ),不再需其它的表面改性,該柱填料一般比烷基鍵合硅膠或多孔聚合物填料的保留能力更強(qiáng),石墨化碳可用于分離 某些幾何導(dǎo)構(gòu)體,又由于HPLC流
 
  動(dòng)相中不會(huì)被溶解,這類(lèi)柱可在任何PH與溫度下使用。氧化鋁也可用于HPLC, 氧化鋁微粒剛性強(qiáng),可制成穩(wěn)定的色譜柱柱床,其優(yōu)點(diǎn)是可在PH高達(dá)12的流動(dòng)相中使用。
 
  但 由于氧化鋁與堿性化合物作用也很強(qiáng),應(yīng)用范圍受到一定的限制,所以未能廣泛應(yīng)用,新型氧化鋯填料也可用于HPLC,商品化的僅有聚合物涂層的多孔氧化鋯微 球色譜柱,應(yīng)用PH范圍1~14,溫度可達(dá)100℃。由于氧化鋯填料幾年才開(kāi)始研究,加之面臨的實(shí)驗(yàn)難度,其重要用途與優(yōu)勢(shì)尚在進(jìn)行中。

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